Analyse des gels d'électrophorèse

Identification des allèles du marqueur PV92 amplifiés par PCR

TP TS spé 2010

Les gels présentés ici correspondent aux résultats d'une expérimentation, réalisée par les élèves d'une classe de Ts spé (24 élèves, répartis en 8 trinômes), étalée sur deux séances de TP dirigées par Laurent Houssel (+ Jean Jacques Auclair).
Au cours de la première séance (11mars), les élèves ont extrait leur ADN génomique (16 extractions, 8 à partir de cellules de l'épithélium buccal, 8 à partir de cellules du follicule pileux) et lancé l'amplification du marqueur PV92. La deuxième séance (18 mars) a été consacrée à la mise en oeuvre de l'électrophorèse et à la révélation des gels. Chaque élève a réalisé un dépôt. L'analyse des gels permet de déterminer la taille approximative des allèles du marqueur, celle de la séquence Alu présente dans l'allèle + et les génotypes.

Au niveau des puits
- E1... E16 : ADN élève
- c : cellules follicule pileux
- b : cellules épithélium buccal
- +/+, +/-, -/- : contrôles
- MT : marqueur de taille
(1000 pb, 700 pb, 500 pb)
En bout de piste
+/+, +/-, -/- : génotype élève
Les bandes révélées soit pour les contrôles soit pour les échantillons d'ADN des élèves (E) correspondent aux fragments prévus de taille 622 pb pour la bande la plus avancée et de taille 934 pb pour l'autre.
Sur 16 essais, 12 fournissent des résultats interprétables avec 1 élève hétérozygote, 2 homozygotes +/+ et 9 homozygotes -/-. Il y a donc 3 élèves sur 12 (25%) qui possèdent au moins un allèle du marqueur PV92 ayant intégré la séquence Alu d'environ 300pb.
Auteur, professeur SVT: Auclair Jean Jacques
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