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Le gène qui code la GFP (ou la BFP) est associé, dans le plasmide vecteur de la transgenèse, au promoteur T7, courte séquence capable de se lier spécifiquement à la T7 ARN polymérase. La transcription du transgène passe obligatoirement par la formation d'un complexe promoteur T7 / T7 ARN polymérase. Les bactéries de la souche hôte doivent donc obligatoirement produire la T7 ARN polymérase, elles ont intégré dans leur chromosome le gène qui code cette enzyme (à l'origine dans le génome d'un bactériophage). Il est contrôlé par le puissant promoteur lac (initialement présent chez E. coli.) dont le site opérateur peut être occupé par un répresseur (protéine), ce qui bloque la transcription du gène.
La présence l'IPTG, analogue de l'inducteur naturel (lactose), dans la cellule entraîne la formation de complexes IPTG-répresseur. La protéine répresseur ne peut plus alors se fixer au site opérateur (o) ce qui rend le site promoteur accessible pour l'ARN polymérase de la bactérie. Le gène T7 ARN polymérase est alors transcrit et la traduction des ARNm conduit à la production de la T7 ARN polymérase qui peut alors, à son tour, transcrire le gène GFP. Dans ces conditions, la T7 ARN polymérase étant très efficace, il y a surexpression du gène GFP et synthèse d'une grande quantité de molécules de GFP. |